名称: 重组人胰岛素

汉语拼音: Chongzu Ren Yidaosu

英文名: Recombinant Human Insulin

性状: 本品为白色或类白色的结晶性粉末。 本品在水、乙醇和乙醚中几乎不溶，在稀盐酸和稀氢氧化钠溶液中易溶。

鉴别: （1）在效价测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 （2）取本品适量，用0.1%三氟醋酸溶液制成每1ml中含10mg的溶液，取20μl，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液（pH7.3）20μl、0.1%V8酶溶液20μl与水140μl，混匀，置37℃水浴中2小时后，加磷酸3μl，作为供试品溶液；另取重组人胰岛素对照品适量，同法制备，作为对照品溶液。照效价测定项下的方法，以0.2mol/L硫酸盐缓冲液（pH2.3）-乙腈（90:10）为流动相A，乙腈-水（50:50）为流动相B，进行梯度洗脱。 时间（分） 流动相 A％） 流动相 B（％） 0 90 10 5 80 20 45 40 60 50 40 60 取对照品溶液和供试品溶液各25μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品的肽图谱应与对照品的肽图谱一致。

检查: 相关蛋白质 取本品适量，用0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含3.5mg的溶液，作为供试品溶液。照效价测定项下的方法，以0.2mol/L硫酸盐缓冲液（pH2.3）-乙腈（82:18）为流动相A，乙腈-水（50:50）为流动相B，进行梯度洗脱。 时间（分） 流动相A（％） 流动相B（％） 0 78 22 36 78 22 61 33 67 67 33 67 调节流动相比例使重组人胰岛素主峰的保留时间约为25分钟，系统适用性试验应符合效价测定项下的规定。取供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按面积归一化 法计算，总相关蛋白质不得过3.0%。 高分子蛋白质 取本品适量，用0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含4mg的溶液，作为供试品溶液。照分子排阻色谱法（附录Ⅴ H）试验。以色谱用亲水硅胶为填充剂（3-10μm）；冰醋酸-乙腈-0.1%精氨酸溶液（15:20:65）为流动相，流速为每分钟0.5ml，检测波长为276nm。取重组人胰岛素单体-二聚体对照品用0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含4mg的溶液；取100μl注入液相色谱仪，重组人胰岛素单体与二聚体的分离度应符合要求。取供试品溶液100μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按峰面积归一化法计算，高分子蛋白质总量不得过1.0%。 锌 取本品适量（约相当于锌0.1mg），精密称定，置10ml量瓶中，用0.01mol/L盐酸溶液溶解并稀释至刻度，作为供试品溶液；取供试品溶液与标准锌溶液（精密称取硫酸锌44mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，每1ml相当于10μg的Zn）各1.6ml，分别置10ml量瓶中，各加硼酸-氯化钠缓冲液（pH9.0）2ml与新制的锌试剂溶液（取锌试剂0.13g，加氢氧化钠试液2ml溶解后，加水使成100ml）1ml，加 水稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，照紫外-可见分光光度法 （附录Ⅳ A），在620nm的波长处分别测定吸光度，计算。含锌量不得过1.0%。 氮 取本品约10mg，精密称定，照氮测定法（附录Ⅶ D第二法）测定，按干燥品计算，含氮量应为14.5%-16.5%。 干燥失重 取本品0.2g，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过10.0%（附录Ⅷ L）。 炽灼残渣 取本品约0.4g，依法检查（附录Ⅷ N），遗留残渣不得过2.0%。 微生物限度 取本品0.2g，依法检查（附录Ⅺ J），每1g中含细菌数不得过300个。 细菌内毒素 取本品，依法检查（附录Ⅺ E），每1mg重组人胰岛素中含内毒素的量应小于10EU。

贮藏: 遮光，密闭，在-15℃以下保存。

制剂: （1）重组人胰岛素注射液（2）精蛋白重组人胰岛素注射液

中西药分类: 西药（包括化学药品、生化药品、抗生素、放射性药品、药用辅料））

化学成分: 本品为重组DNA技术生产的由5l个氨基酸残基组成的蛋白质。按干燥品计算，含重组人胰岛素（包括A21脱氨胰岛素）应为95.0%-105.0%，每1IU重组人胰岛素相当于0.0347mg。 重组人胰岛素中残余宿主DNA和宿主细胞蛋白质为与生产过程相关的。潜在的特异性杂质，必须在生产过程中严格控制，每1mg重组人胰岛素中宿主细胞蛋白不得过10ng。每剂量重组人胰岛素中宿主DNA不得过10ng。

分子式与分子量: C257H383N65O77S6 5807.69

效价测定: 照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（5-10μm）；0.2mol/L硫酸盐缓冲液（取无水硫酸钠28.4g，加水溶解后，加磷酸2.7ml、水800ml，用乙醇胺调节pH值至2.3，加水至1000ml）-乙腈（74:26，或适宜比例）为流动相；往温为40℃；检测波长为214nm。取重组人胰岛素对照品，用0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含1mg的溶液，室温放置至少24小时后，取20μl注入液相色谱仪，胰岛素峰与A21脱氨胰岛素峰的分离度不小于1.8，拖尾因子不大于l.8。 测定法 取本品适量，精密称定，用0.01mol/L盐酸溶液定量稀释制成每1ml中含10单位的溶液（临用新配）。精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取重组人胰岛素对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。

药理作用: 降血糖药