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中国药典2005版收载品种：风疹减毒活疫苗（人二倍体细胞）
名称:
风疹减毒活疫苗（人二倍体细胞）
汉语拼音:
Fengzhen jiandu Huoyimiao（Ren Erbeiti xibao）
英文名:
Rubella Vaccine（Human Diploid Cell），Live
药物组成:
本品系用风疹病毒减毒株接种人二倍体细胞，经培养、收获病毒液，加入适宜稳定剂后冻干制成。
用途:
用于预防风疹。
中西药分类:
生物制品（预防类）
生物制品制备:
1 基本要求
生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”有关要求。
2制造
2.1生产用细胞
生产用细胞为人二倍体细胞2BS株、MRCS-5株或经批准的其他细胞株。
2.1.1细胞库管理及检定
应符合“生物制品生产用动物细胞基质制备及检定规程”规定。
取自同批工作细胞库的1支或多支细胞管，经复苏扩增后的细胞仅用于一批疫苗的生产。
2BS株主细胞库细胞世代应控制在第23代以内，工作细胞库细胞世代应控制在第27代以内，生产疫苗用的细胞世代应控制在第44代以内；NllZC－5株主细胞库细胞世代应控制在第23代以内，工作细胞库细胞世代应控制在第27代以内，生产疫苗用的细胞世代应控制在第33代以内。
2.1.2细胞制备
每次取工作细胞库中的1支或多支细胞管，经复苏、胰蛋白酶消化、扩增制备的一定数量并用于接种病毒的细胞为一个消化批。
2.2毒种
2.2.1名称及来源
生产用毒株为风疹病毒BRDⅡ减毒株或经批准的其他经二倍体细胞适应的减毒株。
2.2.2种子批的建立
应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”规定。
疫苗生产应基于病毒种子批系统，BRDⅡ株毒种生产的疫苗应不超过第32代。
2.2.3种子批毒种的检定
主种子批应进行以下全面检定，工作种子批应至少进行2.2.3.1-2.2.3.4项检定。
2.2.3.1鉴别试验
将稀释至100-500 CCID/ml的病毒液与适当稀释的抗风疹病毒免疫血清等量混合后，置37℃水浴60分钟，接种RK-13细胞，置32℃培养7-10天判定结果。风疹病毒应被完全中和（无细胞病变）；同时设血清和细胞对照，均应为阴性；病毒对照的病毒滴度应不低于100CCID50/。
2.2.3.2病毒滴定
取毒种做10倍系列稀释，每稀释度病毒液接种RK－13细胞，置32℃培养7-10天判定结果。病毒滴度应不低于4.8lgCCID50/ml。应同时进行病毒参考品滴定。
2.2.3.3无菌检查
依法检查（附录Ⅻ A），应符合规定。
2.2.3.4支原体检查
依法检查（附录Ⅻ B），应符合规定。
2.2.3.5病毒外源因子检查
依法检查（附录Ⅻ C），应符合规定。
2.2.3.6免疫原性检查
用主种子批毒种制备原疫苗，按常规接种健康易感儿至少30名，分别于免疫前及免疫后4-6周采血，测定风疹病毒抗体，抗体阳转率应不低于95%（HI 法＜1:8为阴性，HI法≥1:8为阳性）。
2.2.3.7猴体神经毒力试验
主种子批或工作种子批毒种应进行猴体神经毒力试验，以证明无神经毒力。每次至少用10只风疹抗体阴性的易感猴，每侧丘脑接种0.5ml（应不低于1个人用剂量的病毒量），观察17-21天，不应有麻痹及其他神经症状出现。注射后48小时内猴死亡数不超过2只可以更换；如超过20%，即使为非特异性死亡，试验也不能成立，应重试。观察期末，每只猴采血测风疹病毒抗体，阳转率应不低于80%，并处死解剖，对大脑和脊髓的适当部位做病理组织学检查，应为阴性。每次试验同时有2只易感猴作为对照，待试验猴处死后10天，第2次采血，对照猴风疹抗体应仍为阴性。
2.2.4毒种保存
冻干毒种应置-20℃以下保存；液体毒种应置-60℃以下保存。
2.3原液
2.3.1细胞制备
同2.1.2项。
2.3.2培养液
培养液为含适量灭能小牛血清的MEM或其他适宜培养液。小牛血清的质量应符合要求（附录Ⅻ D）。
2.3.3对照细胞病毒外源因子检查
依法检查（附录Ⅻ C），应符合规定。
2.3.4病毒接种和培养
毒种与细胞按适当比例接种，置30-32℃培养，当细胞出现一定程度病变时，倾去培养液，用不少于原培养液量的洗液洗涤细胞表面，并换以维持液继续培养。
2.3.5病毒收获
观察细胞病变达到适宜程度时，收获病毒液。可多次换维持液，经培养多次收获病毒液。
2.3.6原液合并
同一细胞批生产的病毒收获液可合并为一批原液。
2.3.7原液检定
按3.1项进行。
2.4半成品
2.1.1配制
根据病毒液度可对原液进行适度稀释，加入适量稳定剂，即为半成品。多批原液可以合并成一批半成品。
2.4.2半成品检定
按3.2项进行。
2.5成品
2.5.1分批
应符合“生物制品分批规程”规定。
2.5.2分装及冻干
应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。分装过程中半成品疫苗应置冰浴中。
2.5.3规格
按标示量复溶后每瓶0.5ml、1.0ml。每1次人用剂量为0.5ml，含风疹活病毒应不低于3.2 lg CCID50。
2.5.4包装
应符合“生物制品包装规程”规定。
3检定
3.1原液检定
3.1.1 病毒滴定
按2.2.3.2项进行，病毒滴度应不低于4.8 lg CCID/ml。
3.1.2无菌检查
依法检查（附录Ⅻ A），应符合规定。
3.1.3支原体检查
依法检查（附录Ⅻ B），应符合规定。
3.2半成品检定
无菌检查
依法检查（附录Ⅻ A），应符合规定。
3.3成品检定
除水分测定外，应按标示量加入灭菌注射用水，复溶后进行以下各项检定。
3.3.1鉴别试验
按2.2.3.1项进行。
3.3.2外观
应为乳酪色疏松体，复溶后为橘红色澄明液体，无异物。
3.3.3水分
应不高于3.0%（附录Ⅶ D）。
3.3.4病毒滴定
取疫苗3-5瓶混合滴定，按2.2.3.2项进行，病毒滴度应不低于3.5lg CCID50/ml。
3.3.5热稳定性试验
疫苗出厂前应进行热稳定性试验，应与病毒滴定同时进行。于37℃放置7天后，按2.2.3.2项进行，病毒滴度应不低于3.5lg CCID50/lg。病毒滴度下降应不高于1.01g。
3.3.6牛血清白蛋白残留量
采用酶联免疫法，牛血清白蛋白残留量应不高于50ng/剂。
3.3.7无菌检查
依法检查（附Ⅻ A），应符合规定。
3.3.8异常毒性检查
依法检查（附录Ⅻ F），应符合规定。
4保存、运输及有效期
于8℃以下避光保存和运输。自病毒滴度检定合格之日起，有效期为1年6个月。
5使用说明风疹减毒活疫苗（人二倍体班胞）使明说明
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